另外，還進(jìn)行了飼喂生豬的效果觀察。 ２．正交試驗(yàn)結(jié)果分析 本試驗(yàn)僅對4個(gè)主要營養(yǎng)指標(biāo)進(jìn)行分析，從表3可知因素對氨基酸總和、粗蛋白、可溶性糖含量及降解的影響分別是Ｄ→Ａ→Ｂ→Ｃ、Ａ→Ｄ→Ｃ→Ｂ、Ｄ→Ｃ→Ｂ→Ａ、Ｄ→Ａ→Ｃ→Ｂ。綜合分析其主次關(guān)系是Ｄ＞Ａ＞Ｂ＞Ｃ，即影響酒精糟飼料主要指標(biāo)的主要因素是溫度，次要因素為ＰＨ值。從試驗(yàn)可以看出，最佳工藝組合為Ａ3Ｂ1Ｃ3Ｄ2，即ＰＨ值為6，接種量2‰，時(shí)間5天，溫度25℃。
天意ＥＭ原露技術(shù)在酒精糟綜合利用上的研究
目前，環(huán)境惡化和資源短缺使人類社會面臨著巨大挑戰(zhàn)，ＥＭ原露技術(shù)的誕生和推廣應(yīng)用，為發(fā)展無公害清潔環(huán)保產(chǎn)業(yè)，走可持續(xù)發(fā)展道路帶來了希望。我國是一個(gè)糧食生產(chǎn)和消耗大國，由于畜牧業(yè)的興起，飼料用糧量逐年增加。僅每年生產(chǎn)5000萬t配合飼料需要用掉3500萬t糧食，約占年均糧食產(chǎn)量的7.8％左右。一方面，依賴糧食的畜牧業(yè)始終面臨著原糧不足的困境，其發(fā)展受到很大限制，急需開發(fā)新的代糧飼料，以發(fā)展節(jié)糧型畜牧業(yè)；另一方面，以糧食或其它淀粉作物為資源的釀造工業(yè)廢糟及農(nóng)副產(chǎn)品的利用率卻很低。由于缺乏有效的方法加以利用，不僅浪費(fèi)大量有機(jī)資源，還造成環(huán)境污染。往年產(chǎn)6萬t酒精的酒精廠，今年產(chǎn)生酒精糟液達(dá)100萬t以上，引起水質(zhì)污染所造成的經(jīng)濟(jì)損失難以估量，而其中約有12 ％的固形有機(jī)物也白白浪費(fèi)了。因此，采用現(xiàn)代微生物技術(shù)開發(fā)新的可再生利用的資源已成為各國學(xué)者關(guān)注的熱點(diǎn)課題之一。
我國對酒精糟的開發(fā)利用已有不少的研究，但由于一些技術(shù)難點(diǎn)尚未很好解決或花費(fèi)資金太大，至今尚未得到廣泛應(yīng)用。國內(nèi)ＥＭ原露技術(shù)的開發(fā)應(yīng)用已取得了很大的成效，但酒精糟上的應(yīng)用研究尚未見報(bào)道。因此，我們從1996年10月開始此項(xiàng)研究，以期在酒精糟有效利用上開辟新途徑。
一、材料與方法
１．原料 酒精廢糟液、秸稈、麩皮、糖蜜。
２．菌種 ＥＭ原露。
３．測定方法 總氨基酸，甲醛滴定法；粗蛋白，微量凱氏法；粗纖維，酸性洗滌法；粗脂肪，索氏抽提法；可溶性糖，蒽銅比色法。
４．試驗(yàn)設(shè)計(jì) 單因素試驗(yàn)溫度為15℃，25℃，30℃，35℃，40℃；ＰＨ值為3，4，5，6，7；接種量為0.5‰，1‰，2‰，5‰，10‰；時(shí)間（天）為3，4，5，6，7。通過單因素試驗(yàn)結(jié)果的分析，確定了正交試驗(yàn)的水平和因素（見表1）。
表１ 正交試驗(yàn)因素和水平水平 因 素 ＰＨ（Ａ） 接種量（Ｂ） 時(shí)間（℃） 溫度（Ｄ） 1 4 2 3 15 2 5 5 4 25 3 6 10 5 30
５．工藝流程 提取酒精后的廢糟液，經(jīng)80目口錐網(wǎng)過濾機(jī)回收酒精糟后，放置自然蒸發(fā)冷卻。用粉碎機(jī)將作物秸稈充分粉碎，碎粒≤0.5cm。再將酒精糟與秸稈粒及麩皮按10∶3∶1的比例混合，并接種ＥＭ原露稀釋液，充分?jǐn)嚢杌炀螅腿氚l(fā)酵池進(jìn)行厭氧發(fā)酵。具體工藝流程如下：
秸稈粉碎
↓
酒精→ 微孔 → 蒸發(fā)濃→ 配料 → 接種 → 固體 → 成品
糟液 過濾 縮冷卻 混合 攪拌 發(fā)酵 飼料
二、結(jié)果與分析
１．單因素試驗(yàn)結(jié)果分析
⑴ＰＨ值對發(fā)酵的影響 從方差分析結(jié)果說明，不同ＰＨ值差異達(dá)極顯著水平（Ｆ0.01＞6），最佳的ＰＨ值為5－6，最適宜于ＥＭ原露微生物的作用（見表2）。
⑵接種量對發(fā)酵的影響 表2說明最佳的接種量為5‰－10‰，但方差分析差異未達(dá)顯著水平（Ｆ0.05＞3.5），2‰－10‰之間效果差異并不太大，而新復(fù)極差測驗(yàn)（ＳＳＲ）2‰達(dá)顯著水平。因此，為了節(jié)約ＥＭ用量，降低成本，使用2‰－5‰的接種量可達(dá)到充分發(fā)酵的目的。
⑶不同時(shí)間對發(fā)酵的影響 Ｆ檢驗(yàn)說明差異不明顯（Ｆ0.05＞3.5）， 但從表2可知最佳時(shí)間為4天，經(jīng)4天發(fā)酵可達(dá)理想效果。
⑷溫度對發(fā)酵的影響 方差分析可知差異達(dá)到顯著水平（Ｆ0.01＞6.0）， 為達(dá)到理想的發(fā)酵效果應(yīng)嚴(yán)格控制溫度，特別是溫度不超過35℃。最適溫度為25－30℃，低于15℃或40℃以上極不適于ＥＭ原露發(fā)酵。
表２ 不同ＰＨ值及接種量、時(shí)間和溫度發(fā)酵的氨基酸總含量
重復(fù)ＰＨ值 接種量（‰） 3 4 5 6 7 0.5 1 2 5 10 1 7.2 9.1 19.0 19.1 10.3 18.0 15.6 20.9 20.1 22.0 2 7.0 11.4 17.3 21.0 10.7 17.8 21.6 17.6 21.6 23.6 3 7.4 11.0 19.5 20.8 12.0 16.7 17.4 17.9 19.5 23.7 ∑x 21.6 31.5 55.8 60.9 33.0 52.5 54.6 56.6 61.2 69.3 x 7.2 10.5 18.6 20.3 11.0 17.5 18.2 18.8 20.4 23.1
重復(fù)時(shí)間（天） 溫度（℃） 3 4 5 6 7 15 25 30 35 40 1 17.5 21.2 20.5 17.7 17.6 16.8 23.0 21.7 13.8 9.9 2 18.4 20.8 18.6 19.2 17.9 16.2 22.2 23.5 14.6 11.2 3 19.2 19.2 18.4 19.5 16.1 16.5 23.2 22.6 14.2 10.9 ∑ 54.6 61.2 57.6 56.4 51.6 49.5 68.4 67.8 42.6 33 18.6 20.4 19.2 18.8 17.2 16.5 22.8 22.6 14.2 11
３．飼料主要特性及初步飼喂效果 最佳發(fā)酵條件組合下的發(fā)酵產(chǎn)品呈褐黃色，帶有清香甜酸味，基本消除原酒精糟刺鼻的氣味，主要項(xiàng)目指標(biāo)均有明顯改善，其中粗蛋白含量為25.60％，增加4.4倍，氨基酸總和為22.80％，增加近4.6倍，粗纖維也有較大的降解。少批量飼喂豬結(jié)果表明：適口性好，生長較快，抗病能力增加，毛發(fā)亮潔，糞便臭味大大減輕。
表３ ＥＭ原露酒精糟發(fā)酵工藝條件正交試驗(yàn)分析表內(nèi)容 序號 A B C D A B C D A B C D A B C D 指標(biāo) 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 1 2 2 2 1 2 2 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 1 3 3 3 1 3 3 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 2 1 2 3 2 1 2 3 2 1 2 3 5 2 2 3 1 2 2 3 1 2 2 3 1 2 2 3 1 6 2 3 1 2 2 3 1 2 2 3 1 2 2 3 1 2 7 3 1 3 2 3 1 3 2 3 1 3 2 3 1 3 2 8 3 2 1 3 3 2 1 3 3 2 1 3 3 2 1 3 9 3 3 2 1 3 3 2 1 3 3 2 1 3 3 2 1
續(xù)表3氨 基 酸 總 量 蛋 白 質(zhì) 粗 纖 維 可 溶 性 糖 K1 34.2 40.2 40.8 22.2 26.1 31.5 36.0 25.8 95.3 93.0 91.4 96.3 30.2 37.4 30.1 29.5 K2 37.5 39.3 36.5 49.8 31.2 36.0 27.3 36.3 90.0 89.8 94.4 90.5 37.4 34.2 33.8 34.7 K3 43.2 35.4 37.5 42.9 38.7 28.5 32.7 33.9 90.4 92.6 90.0 88.0 34.4 30.4 38.1 37.8 R1 11.4 13.4 13.6 7.4 8.7 10.2 12.0 8.6 31.8 31.0 30.5 32.1 10.1 12.5 10.0 9.8 R2 12.5 13.1 12.2 16.6 10.4 12.0 9.1 12.1 30.0 29.9 31.5 30.1 12.5 11.4 11.3 11.6 R3 14.4 11.8 12.5 14.3 12.9 9.5 10.9 11.3 30.1 30.9 30.9 29.3 11.5 10.1 12.7 12.6 R 3 1.6 1.1 9.2 4.2 2.5 2.8 3.5 1.8 1.1 1.5 2.8 1.4 2.4 2.7 2.8
表４ 各組發(fā)酵主要營養(yǎng)指標(biāo)測定結(jié)果（％）
組 合項(xiàng) 目 氨基酸
總和粗蛋白 粗纖維 可溶性糖磷 粗脂肪
無機(jī)
原料(發(fā)酵前) 6.6 5.8 38.56 8.2 1.90 1.26 Ａ1Ｂ1Ｃ1Ｄ1 12.10 11.6 30.23 8.4 1.92 1.38 Ａ1Ｂ2Ｃ2Ｄ2 16.50 19.14 30.31 10.15 2.24 1.42 Ａ1Ｂ3Ｃ3Ｄ3 20.40 16.24 30.15 11.20 2.57 1.45 Ａ2Ｂ1Ｃ2Ｄ3 19.30 17.98 30.11 11.70 2.64 1.42 Ａ2Ｂ2Ｃ3Ｄ1 11.50 19.05 33.62 10.15 1.87 1.39 Ａ2Ｂ3Ｃ1Ｄ2 21.70 23.20 29.92 10.40 2.36 1.44 Ａ3Ｂ1Ｃ3Ｄ2 22.80 25.60 29.42 14.50 2.64 1.45 Ａ3Ｂ2Ｃ1Ｄ3 22.40 24.70 27.38 11.50 2.72 1.44 Ａ3Ｂ2Ｃ2Ｄ1 11.80 12.30 33.45 8.26 2.02 1.42
三、小結(jié)與討論
１．發(fā)酵最適溫度為25－30℃左右，并注意前期保溫，后期降溫。溫度高于30℃或低于25℃都會影響發(fā)酵效果。由于原料酸堿性（ＰＨ＝6.15）與要求的最佳ＰＨ值基本相同，因此，實(shí)際應(yīng)用中不需進(jìn)行ＰＨ調(diào)節(jié)。最佳接種量2‰－5‰對發(fā)酵效果影響不大，為節(jié)約ＥＭ原露用量大規(guī)模生產(chǎn)選用2‰為宜。發(fā)酵最佳時(shí)間為4－5天，較長的發(fā)酵時(shí)間無明顯效果變化。
２．酒精糟經(jīng)ＥＭ原露的生長代謝轉(zhuǎn)化，能有效提高主要營養(yǎng)成分的含量，發(fā)酵后，飼料中富含大量多種有益菌體及一些生物活性物質(zhì)和促生長調(diào)節(jié)因子，易吸收消化，飼料適口性也有大大改善。因此，比單一菌種發(fā)酵和普通使用的配合飼料有許多優(yōu)點(diǎn)，利用酒精糟進(jìn)行ＥＭ原露固體發(fā)酵是酒精廠、酒廠綜合利用的有效途徑，必將帶來顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。
３．經(jīng)過濾后的酒精糟仍含有80％左右的水分，需注意充分蒸發(fā)。拌料接種時(shí)含水量在40％左右，即用手捏成團(tuán)，不出水，放開易散開為宜。水分過多會造成腐爛發(fā)臭。發(fā)酵后，氣味清香甜酸說明成功，反之，僅有刺鼻酸味說明發(fā)酵失敗。
４．ＥＭ原露固體發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)酒精糟飼料，所需設(shè)備簡單，操作簡便，不需滅菌等復(fù)雜過程，工藝條件容易控制掌握，因此，容易普及和進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)。
５．與谷類酒精糟相比，薯干酒精纖維素含量高，蛋白質(zhì)含量低，為進(jìn)一步提高發(fā)酵飼料的價(jià)值，在原料使用上，可添加豆類作物秸稈或其它含氮物質(zhì)。